느티만가닥버섯의 분자유전학적 분류 및 품종특이적 DNA 마커 탐색

Abstract

느티만가닥버섯의 품종구분을 위하여 국내 버섯보존기관으로부터 수집한 30종의 품종에 대한 RAPD 분석을 실시하였다. 이를 위하여 고체배지상의 균사로부터 염색체 DNA를분리하였고 이를 주형으로 하여 3개의 random primer로PCR 반응을 수행하였다. 그 결과 각 PCR 반응에서 200 bp 에서 3000 bp 범위의 크기를 가진 DNA 밴드 약 30종이 관찰되었다. DNA 밴드 패턴은 UPGMA 방법으로 분석하여 그결과를 dentrogram으로 나타내었다. 느티만가닥버섯은 2개의클러스터로 분석되었으며, 클러스터 1은 다시 3개의 작은 그룹으로 나눌 수 있었다. 반면, 클러스터 2의 경우에는 유전적으로 클러스터 1보다 다양한 품종으로 구성되어 있었다. 흥미롭게도 덕유산에서 채집된 야생종 Hm3-10의 경우 어느 클러스터에도 속하지 않는 고유의 품종임을 확인하였다. RAPD 결과 나타나는 품종별 고유의 DNA 밴드를 품종특이적 마커로 개발하기 위하여, Hm0-4 품종의 250 bp 특이밴드를 TA-클로닝하고 염기서열을 결정하였다. 결정된 염기서열을 바탕으로 PCR primer를 디자인하였고 이를 이용하여 PCR 반응을수행하였다. 그 결과 250 bp DNA 밴드는 Hm0-4 품종에서만관찰되었으며 이는 이러한 접근법이 품종특이적 마커개발에잘 적용됨을 보여주는 것이다.